
Nanostring主题技术重要有以下关键步骤:
首先Nanostring设计了两种类型的分子探针,一个是捕获探针,一个是汇报探针。
捕获探针它是由于指标分子互补的序列组成的,汇报探针会与指标分子的另表一端相应互补,并且带有一个荧光编码。当把要检测的生物样本筹备好之后,与特定的探针结合,经过孵育之后就会与碳相应的指标分子进行杂交,这个过程很快就能实现。
为了去除没有结合的探针和非个性的布景信号,会执行洗涤的步骤,仅保留下来杂交复合物。
Nanostring分析系统选取这个数字技术步骤,每个杂交形成的复合物都被固定在片上分歧的空间地位,而后通过数字扫描仪读取汇报探针上的荧光编码,推算出每个特定的序列被检测到的次数,这种数字技术预防了QPCR之类必要扩增的步骤从而大大削减了引入的误差或者不确定的可能性。