一、技术简介：

沉组腺病毒（Adenovirus）是一种高效且靠得住的病毒表白系统，可用于在哺乳动物细胞中实现主张蛋白或shRNA的瞬时高水平表白
。

其具备以下利益：
1. 宿主领域广：腺病毒可习染多种哺乳动物细胞类型，不仅可习染险些所有人源细胞，还可习染大鼠、幼鼠、兔、猪、羊、猴及鸡等多种物种起源的细胞
。
2. 不依赖细胞周期：腺病毒习染不依赖细胞周期，既可习染增殖细胞，也可习染非增殖细胞
。
3. 高效瞬时表白：表源基因表白水平高，且不整合入宿主基因组
。
4. 病毒滴度高：合用于体内表尝试钻研
。
 
本系统以Ad5血清型E1/E3缺失型腺病毒DNA为骨架，对克隆、包装及扩增等关键步骤进行了系统优化，从而实现更高的克隆阳性率、更不变的包装过程及更高的病毒滴度
。所造备的沉组腺病毒已成功利用于细胞凋亡检测、染色质免疫沉淀（ChIP）、RT-PCR及免疫共沉淀（Co-IP）等尝试
。

二、尝试步骤及周期：

1. 将主张基因插入腺病毒沉组穿梭质粒中，尝试周期为7个工作日， 如要求对载体的特定部件有所要求而需进行特殊刷新，则此步尝试路线及尝试周期另行划定
。
2. 将主张基因转移至腺病毒骨架中，尝试周期为7个工作日
。
3. 将确定正确的沉组腺病毒质粒在293A细胞进行包装，功夫约为20个工作日
。
4. 腺病毒扩增和CsCl纯化，尝试周期为7个工作日
。
5. 对包装出的沉组病毒进行质检
。
质检蕴含对终产品病毒基因进行PCR和Western blot（WB）以确认主张基因的存在，尝试周期为5个工作日
。
 

三、服务承诺：

1. 提供的病毒量为1ml滴度>10¹⁰VP/ml，如需更大批的病毒请具体再商洽
。
2. 提供穿梭质粒，沉组腺病毒质粒及有关酶切鉴定电泳图，测序汇报、终产品PCR或WB鉴定的尝试汇报
。
3. 为了确保服务质量，合同周期为在尝试周期的基础上加10个工作日
。
 

四、利用事俘：

Fig1:Infection efficiency of Ad-Fos in CGNs. DIV5 CGNs were infected with Ad-Fos at MOI of 100. Thirty six hours after infection phase-contrast light and fluorescent micrographs of the infected cells were visualized. The cells infected with Ad-Fos were fixed and were stained with a Flag-specific M2 antibody or without a primary antibody (-1°). Infection efficiency of adenovirus is about 80%.